PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

A case series study was conducted to determine the frequency of causes of abortion in dairy cattle in Uruguay. The sample size of 102 cases was composed of 53 fetuses, 35 fetuses with placentas, and 14 placentas without an associated fetus. All cases underwent gross and microscopic pathologic examinations as well as microbiological and serological testing. The etiology was determined in 54 (53%) of cases, 51 of which were caused by infectious agents. Within the observed 102 cases, 30 (29%) were caused by Neospora caninum, six (6%) by Coxiella burnetii and two (2%) by Campylobacter fetus subsp. venerealis. Bovine Parainfluenza-3 virus and Salmonella enterica serovar Newport caused one abortion each. Opportunistic bacteria (Escherichia coli, Streptococcus sp., Staphylococcus sp., Mannheimia sp., Trueperella pyogenes, and Providencia stuartii) were associated with 11 abortions. In two cases the fetal death was attributed to dystocia, and in one case the fetus had a congenital mesothelioma. Bovine viral diarrhea virus (BVDV) infection was identified in three fetuses; two of which were co-infected with and had typical lesions of N. caninum. No lesions were observed in the other fetus infected by BVDV. Leptospira interrogans was identified in one fetus without lesions. Despite the relatively low overall success rate in establishing an etiological diagnosis in cases of abortion in cattle, a systemic workup of bovine abortion is necessary to establish prevention and control strategies. This also facilitates monitoring and surveillance of reproductive diseases in dairy cattle, some of which represent a risk to public health.

• Dairy cattle Uruguay bovine abortion Campylobacter fetus Coxiella burnetii Neospora caninum cattle

Abstract in Portuguese:

Uma série de casos foi estudada para determinar a frequência de causas do aborto em bovinos leiteiros no Uruguai. A amostra, de 102 casos, foi composta por 53 fetos, 35 fetos com placentas e 14 placentas sem feto associado. Todos os casos foram submetidos a exames patológicos macroscópicos e microscópicos, além de testes microbiológicos e sorológicos. A etiologia foi determinada em 54 (53%) dos casos, 51 dos quais foram causados por agentes infecciosos. Nos 102 casos observados, 30 (29%) foram causados por Neospora caninum, seis (6%) por Coxiella burnetii e dois (2%) por Campylobacter fetus subsp. venerealis. O vírus da Parainfluenza-3 e Salmonella enterica serovar Newport causaram um aborto cada. Bactérias oportunistas (Escherichia coli, Streptococcus sp., Staphylococcus sp., Mannheimia sp., Trueperella pyogenes e Providencia stuartii) foram associadas a 11 abortos. Em dois casos, a morte fetal foi atribuída a distocia e, em um caso, o feto apresentava mesotelioma congênito. A infecção pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) foi identificada em três fetos; dois dos quais foram co-infectados e apresentavam lesões típicas de N. caninum. Não foram observadas lesões no outro feto infectado pelo BVDV. Leptospira interrogans foi identificada em um feto sem lesões. Apesar da relativamente baixa taxa de sucesso no diagnóstico etiológico nos casos de aborto em bovinos, é necessário o diagnóstico sistemático dos abortos para estabelecer estratégias de prevenção e controle. Isso também facilita o monitoramento e a vigilância de doenças reprodutivas em bovinos leiteiros, algumas das quais representam um risco para a saúde pública.

• Aborto bovino bovinos de leite Uruguai Campylobacter fetus Coxiella burnetii Neospora caninum

Abstract in English:

ABSTRACT.- Alves T.M., Heneine L.G.D., Araújo B.S., Silva L.M., Campos P.C., Hermogenes M.S. & Lage A.P. 2012 Production and characterization of monoclonal antibodies against Campylobacter fetus subsp. venerealis. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(7)640-644. Laboratório de Bacteriologia Aplicada, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais. Av. Antônio Carlos 6627, Cx. Postal 567, Belo Horizonte, MG 30123-970, Brazil. E-mail: alage@vet.ufmg.br. Myeloma cells Sp2/0-Ag14 and spleen cells from BALB/c mouse immunized with sonicated Campylobacter fetus subsp. venerealis NCTC 10354 were fused with polyethylene glycol (PEG) for the selection of clones producing antibodies. Clones were obtained by limiting dilution and screened for the production of specific antibodies to C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 by indirect ELISA and western blot against a panel of bacteria: C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354, C. fetus subsp fetus ADRI 1812, C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, C. lari NCTC 11352, and Arcobacter skirrowii LMG 6621 for the ELISA and C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 and C. sputorum biovar sputorum LMG 6647 for the western blotting. Fifteen clones producing monoclonal antibodies (MAbs) anti-C. fetus subsp. venerealis of the IgM (1) and IgG (14) classes were further screened for species-specificity. Four clones of the 15 obtained were producers of species-specific monoclonal antibodies (MAbs): two were specific for C. fetus subsp. venerealis and two were specific for C. fetus subsp. fetus. None of the clones were reactive against C. sputorum biovar sputorum LMG 6647. All clones recognized a protein with molecular mass of approximately 148 kDa from lysed C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354.

• Campylobacter fetus subsp. venerealis campylobacteriosis campilobacteriose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Alves T.M., Heneine L.G.D., Araújo B.S., Silva L.M., Campos P.C., Hermogenes M.S. & Lage A.P. 2012 Production and characterization of monoclonal antibodies against Campylobacter fetus subsp. venerealis. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(7)640-644. Laboratório de Bacteriologia Aplicada, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais. Av. Antônio Carlos 6627, Cx. Postal 567, Belo Horizonte, MG 30123-970, Brazil. E-mail: alage@vet.ufmg.br. Para a produção de anticorpos monoclonais contra Campylobacter fetus subsp. venerealis foram utilizadas as linhagens de células de mieloma Sp2/0-Ag14 e células de baço de camundongos BALB/c imunizados com sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354. A detecção dos anticorpos monoclonais foi realizada por ELISA indireto utilizando antígeno sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354. A clonagem foi realizada por diluição limitante e os clones foram caracterizados por ELISA indireto utilizando um painel de bactérias escolhidas em função da prevalência e habitats: C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354, C. fetus subsp. fetus ADRI 1812, C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, C. lari NCTC 11352 e Arcobacter skirrowii LMG 6621; e no “western blotting” utilizando antígenos sonicados de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 e C. sputorum biovar sputorum LMG 6647. Foram obtidos 15 clones produtores de anticorpos anti- C. fetus subsp. venerealis das classes IgM (1) e IgG (14). Quatro clones dentre os 15 clones obtidos foram produtores de anticorpos monoclonais espécie-específicos: dois clones reagiram com maior especificidade contra C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 e dois clones reagiram com maior especificidade contra C. fetus subsp. fetus ADRI 1812. Nenhum dos clones reagiu contra C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, comprovando a especificidade dos anticorpos monoclonais testados. Todos os clones reconheceram uma proteína de massa molecular de aproximadamente 148 kDa no sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Alves T.M,, Stynen A.P.R, Miranda K.L. & Lage A.P. 2011. [Bovine genital campylobacteriosis and bovine genital trichomonosis: Epidemiology, diagnosis and control.] Campilobacteriose genital bovina e tricomonose genital bovina: epidemiologia, diagnóstico e controle. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(4):336-344. Laboratório de Bacteriologia Aplicada, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais. Av. Antônio Carlos 6627, Cx. Postal 567, Belo Horizonte, MG 30123-970, Brazil. E-mail: alage@vet.ufmg.br The present update deals with two of the most important sexually transmitted diseases of cattle: bovine genital campylobacteriosis and bovine genital trichomonosis. Epidemiological aspects, mainly their distribution in Brazil, alongside with their diagnosis in cattle are presented and commented. The main points in their diagnoses, including the description of the techniques and the interpretation of the results are also reviewed. Finally the control and prevention of both diseases are discussed.

• Campylobacter fetus subsp. venerealis Tritrichomonas foetus bovine genital campylobacteriosis abortion aborto

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Alves T.M,, Stynen A.P.R, Miranda K.L. & Lage A.P. 2011. [Bovine genital campylobacteriosis and bovine genital trichomonosis: Epidemiology, diagnosis and control.] Campilobacteriose genital bovina e tricomonose genital bovina: epidemiologia, diagnóstico e controle. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(4):336-344. Laboratório de Bacteriologia Aplicada, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais. Av. Antônio Carlos 6627, Cx. Postal 567, Belo Horizonte, MG 30123-970, Brazil. E-mail: alage@vet.ufmg.br A presente atualização trata de duas das mais importantes doenças sexualmente transmitidas de bovinos, a campilobacteriose genital bovina e a tricomonose genital bovina. São abordados aspectos relacionados à epidemiologia destas doenças, principalmente em relação a sua distribuição no Brasil. Também são revisados aspectos importantes de diagnóstico, incluindo as técnicas e interpretação dos resultados, além de medidas de controle para ambas as doenças.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Pellegrin A.O., Miranda K.L., Figueiredo J.F., Barbosa E.F. & Lage A.P. 2011. The use of enzyme-linked immunosorbent assay and immunoblotting for the detection of Campylobacter fetus immunoglobulins in the cervico-vaginal mucus of female cattle. [Uso do ensaio imunoenzimático e imuno-blotting para detecção de imunoglobulinas contra Campylobacter fetus em muco cérvico-vaginal de fêmeas bovinas.] Pesquisa Veterinária Brasileira 31(3):247-254. Embrapa Pantanal, Rua 21 de Setembro 1880, Corumbá, MS 79320-900, Brazil. E-mail: aiesca@cpap.embrapa.br An indirect enzyme-linked immunosorbent assay was developed to detect antigen-specific secretory IgA antibodies to Campylobacter fetus subsp. venerealis in bovine vaginal mucus with a protein extract of the Campylobacter fetus subsp. venerealis by the acid glycine extraction method. Mean optical density measurement (l=450 nm) was 0.143±0.9. The most immunoreactive protein bands of the Campylobacter fetus subsp. venerealis or Campylobacter fetus subsp. fetus recognized by IgA in immunoblotting, using bovine vaginal mucus samples, migrate at 42.6 kDa. The protein that migrates at 93 kDa was recognized exclusively for C. fetus subsp. venerealis. A positive vaginal mucus sample of a cow from negative herd recognized antigens of C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.

• Campylobacter fetus Campylobacteriosis immunoglobulin A Campilobacteriose imunoglobulina A

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Pellegrin A.O., Miranda K.L., Figueiredo J.F., Barbosa E.F. & Lage A.P. 2011. The use of enzyme-linked immunosorbent assay and immunoblotting for the detection of Campylobacter fetus immunoglobulins in the cervico-vaginal mucus of female cattle. [Uso do ensaio imunoenzimático e imuno-blotting para detecção de imunoglobulinas contra Campylobacter fetus em muco cérvico-vaginal de fêmeas bovinas.] Pesquisa Veterinária Brasileira 31(3):247-254. Embrapa Pantanal, Rua 21 de Setembro 1880, Corumbá, MS 79320-900, Brazil. E-mail: aiesca@cpap.embrapa.br Foi padronizado um ensaio imunoenzimático do tipo indireto para detecção de imunoglobulina A (ELISA IgA) anti- Campylobacter fetus subp. venerealis em muco cérvico- vaginal bovino utilizando um extrato protéico de Campylobacter fetus subsp. venerealis produzido pelo método de extração ácida pelo tampão de glicina (0,2M; pH2,2). A média dos valores de densidade ótica (DO450) foi de 0,143±0,09. As bandas protéicas dos antígenos de Campylobacter fetus subsp. venerealis e de Campylobacter fetus subsp. fetus melhor reconhecidas pela IgA do muco cérvico- vaginal migraram em 42,6 kDa mas a proteina evidenciada em 93 kDa foi reconhecida exclusivamente pelo Campylobacter fetus subsp. venerealis. Os anticorpos presentes na amostra de muco vaginal testada no “immunoblotting” que apresentou resultado positivo no ELISA IgA, reconheceu antígenos de C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Groff A.C.M., Kirinus J.K., Sá e Silva M., Machado G., Costa M.M. & Vargas A.P.C. 2010. Polymerase chain reaction for the diagnosis of bovine genital campylobacteriosis. Pesquisa Veterinária Brasileira 30(12):1031-1035. Laboratório de Bacteriologia, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Centro de Ciências Rurais, Universidade Federal de Santa Maria, Av. Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: agueda.vargas@gmail.com Bovine genital campylobacteriosis is a common venereal disease of cattle; the prevalence of this disease can be underestimated mostly because of the nature of the etiological agent, the microaerobic Campylobacter fetus subspecies venerealis. The purpose of the current study was to evaluate the utilization of polymerase chain reaction (PCR) in the diagnosis of genital campylobacteriosis in samples obtained from bull prepuce aspirate, cow cervical mucus, and abomasum contents of aborted fetuses, collected into enrichment medium. Five different DNA extraction protocols were tested: thermal extraction, lysis with proteinase K, lysis with guanidine isothiocyanate, lysis with DNAzol, and lysis with hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB). The specificity, sensitivity, and technical application of the PCR assay were also evaluated with clinical samples and compared to bacterial isolation by standard culture. DNA extraction by the CTAB protocol provided better results in PCR, and it was able to detect 63 colony-forming units per ml of C. fetus. Out of 277 clinical samples tested, 68 (24%) were positive for Campylobacter fetus using PCR, while only 8 (2.8%) of the samples were positive by bacterial isolation in solid medium, proving the superiority of the PCR technique when compared to the standard isolation method, and providing evidence for its usefulness as a better screening test in cattle for the diagnosis of bovine genital campylobacteriosis.

• Bovine genital campylobacteriosis campylobacteriosis Campylobacter fetus campilobacteriose genital bovina

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Groff A.C.M., Kirinus J.K., Sá e Silva M., Machado G., Costa M.M. & Vargas A.P.C. 2010. Polymerase chain reaction for the diagnosis of bovine genital campylobacteriosis. [Reação em cadeia da polimerase para o diagnóstico de campilobacteriose genital bovina.] Pesquisa Veterinária Brasileira 30(12):1031-1035. Laboratório de Bacteriologia, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Centro de Ciências Rurais, Universidade Federal de Santa Maria, Av. Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: agueda.vargas@gmail.com RESUMO.- [Reação em cadeia da polimerase para o diagnóstico de campilobacteriose genital bovina.] Campilobacteriose genital bovina é uma doença venérea comum em bovinos. A prevalência desta doença pode ser subestimada na maioria das vezes pela natureza microaeróbica do agente etiológico, Campylobacter fetus subspecies venerealis. O propósito do presente estudo foi avaliar a utilização da reação de polimerase em cadeia (PCR) no diagnóstico de campilobacteriose genital em amostras obtidas de aspirado prepucial de touros, muco cervical de vacas e conteúdo abomasal de fetos abortados, coletados em meio enriquecido. Cinco protocolos diferentes de extração de DNA foram testados: termo extração, lise com proteinase K, lise com guanidine isothiocyanate, lise com DNAzol e lise com hexadeciltrimetilamônio brometo (CTAB). A especificidade, sensibilidade e a aplicação da técnica da PCR foram também avaliadas com amostras clínicas e comparadas com bactérias isoladas por cultura padrão. DNA extraído pelo protocolo de CTAB demonstrou os melhores resultados na PCR, e foi capaz de detectar 63 unidades formadoras de colônias de C. fetus por ml de meio. Das 277 amostras clínicas testadas, 68 (24%) foram positivas para Campylobacter fetus pela PCR, enquanto 8 (2,8%) das amostras foram positivas por isolamento bacteriológico, provando a superioridade da técnica de PCR quando comparada com métodos padrão de isolamento, e fornecendo evidências de sua utilização como um teste de melhor projeção para diagnóstico em campilobacteriose genital bovina.

Abstract in English:

Vargas A.C., Costa M.M., Groff A.C.M., Viana L.R., Krewer C.C., Spricigo D.A. & Kirinus J.K. 2005. [Antimicrobial susceptibility of Campylobacter fetus subsp. venerealis isolated from cattle.] Susceptibilidade antimicrobiana de Campylobacter fetus subsp. venerealis isolado de bovinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 25(1):1-3. Laboratório de Bacteriologia do Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, 97105-900 Santa Maria, RS, Brazil. E-mail: agueda@ccr.ufsm.br Venereal campylobacteriosis is associated with infection of Campylobacter fetus subsp. fetus and Campylobacter fetus subsp. venerealis. The etiological agent is transmitted by natural bull breeding or artificial insemination using contaminated semen. The present study aimed to determine the in vitro susceptibility of C. fetus subsp. venerealis isolates to antimicrobial drugs generally used in clinical and semen treatment. Reference strains of C. fetus subsp. fetus and C. fetus subsp. venerealis and 21 C. fetus isolates were tested. The susceptibility test was performed by using the modified Kirby-Bauer diffusion disc method. C. fetus subsp. fetus reference strain was resistant to lincomycin and penicillin. C. fetus subsp. venerealis was susceptible to all antimicrobial tested, with exception to C.C. KrewerDnalidixic acid. C. fetus subsp. venerealis samples were sensible to amikacin, ampicillin, cefalotin, streptomycin, gentamycin, penicillin and tetracycline. Drug resistance was observed on 42.86% of lincomycin, 4,76 % of enrofloxacin, and 100% to nalidixic acid. In addition 4.76% of the isolates showed intermediate susceptibility to enrofloxacin, neomycin, polimixin B and 9.52% to lincomycin. The susceptibility of C. fetus isolates to antimicrobial drugs commonly used in clinical and semen treatment was demonstrated.

• Campylobacteriosis cattle semen antibiomicrobials.

Abstract in Portuguese:

Vargas A.C., Costa M.M., Groff A.C.M., Viana L.R., Krewer C.C., Spricigo D.A. & Kirinus J.K. 2005. [Antimicrobial susceptibility of Campylobacter fetus subsp. venerealis isolated from cattle.] Susceptibilidade antimicrobiana de Campylobacter fetus subsp. venerealis isolado de bovinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 25(1):1-3. Laboratório de Bacteriologia do Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, 97105-900 Santa Maria, RS, Brazil. E-mail: agueda@ccr.ufsm.br Venereal campylobacteriosis is associated with infection of Campylobacter fetus subsp. fetus and Campylobacter fetus subsp. venerealis. The etiological agent is transmitted by natural bull breeding or artificial insemination using contaminated semen. The present study aimed to determine the in vitro susceptibility of C. fetus subsp. venerealis isolates to antimicrobial drugs generally used in clinical and semen treatment. Reference strains of C. fetus subsp. fetus and C. fetus subsp. venerealis and 21 C. fetus isolates were tested. The susceptibility test was performed by using the modified Kirby-Bauer diffusion disc method. C. fetus subsp. fetus reference strain was resistant to lincomycin and penicillin. C. fetus subsp. venerealis was susceptible to all antimicrobial tested, with exception to C.C. KrewerDnalidixic acid. C. fetus subsp. venerealis samples were sensible to amikacin, ampicillin, cefalotin, streptomycin, gentamycin, penicillin and tetracycline. Drug resistance was observed on 42.86% of lincomycin, 4,76 % of enrofloxacin, and 100% to nalidixic acid. In addition 4.76% of the isolates showed intermediate susceptibility to enrofloxacin, neomycin, polimixin B and 9.52% to lincomycin. The susceptibility of C. fetus isolates to antimicrobial drugs commonly used in clinical and semen treatment was demonstrated.